CE-LIF of Green Fluorescent Fusion Proteins for Investigation of Phosphorylation

Varování

Publikace nespadá pod Pedagogickou fakultu, ale pod Středoevropský technologický institut. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.

Název česky	Výzkum fosforylace GFP fúzních proteinů pomocí techniky CE-LIF
Autoři	MICHALCOVÁ Lenka DOPITOVÁ Radka HEJÁTKO Jan RYVOLOVÁ Markéta VÁLKOVÁ Martina PREISLER Jan
Rok publikování	2011
Druh	Konferenční abstrakty
Fakulta / Pracoviště MU	Středoevropský technologický institut
Citace
Přiložené soubory	Michalcova_CE-CE_2011.pdf
Popis	Ke studiu protein AHP5 fúzovaného s GFP byla použita metoda CE-LIF s budícím zdrojem laserovou diodou 405 nm. Fúzní protein AHP5-GFP byl exprimován v E.Coli a byl použit k optimalizaci metody, prototože přirozený výskyt tohoto protein je v rostlinách ve velmi nízkých koncetracích. AHP5-GFP je nestabilní a dochází k uvolňování GFP, tato skutečnost není ovlivněna teplotou skladováním (-20 a -80 C) ani přídavkem inhibitorů (EDTA, PMFS). Výsledky byly potvrzeny pomocí western blottingu. Fosforylace vzorku AHP5-GFP in vitro je nadále zkoumána. Pro lepší interpretaci elektroforegramů byl vzorek podroben gelové filtraci, kde byly získány hmotnostní frakce Ty byly zkoumány metodou CE-LIF a western blottingem
Související projekty:	Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací Multidetekční platforma pro mikrokolonové separace proteinů a peptidů CEITEC - středoevropský technologický institut